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纤维连接素相关抗原FRA试剂盒实验操作要点
纤维连接素相关抗原FRA试剂盒实验操作要点
  • 价格:
  • ¥1
  • 产地:
  • 进口国产
  • 品牌:
  • 江莱生物
  • 规格:
  • 96T
  • 更新时间:
  • 2020-8-2 19:21:52
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纤维连接素相关抗原(FRA)试剂盒实验原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被目标物抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标物呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

纤维连接素相关抗原(FRA)试剂盒实验操作要点



纤维连接素相关抗原(FRA)试剂盒操作步骤:

1. 取出纤维连接素相关抗原(FRA)试剂盒,室温(20-25℃)放置 30 分钟。

2. 分组:取出 96 孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6 个浓度)、空白孔、待测样品组。

注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。

3. 加样:依照标准品的顺序分别加入 100ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入 100ul 的蒸馏水;其余微孔中加入100ul 的待测样本。

4. 加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入 50ul 的酶标溶液(空白对照孔除外)。

5. 温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。

6. 洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置 15-30s,充分清洗酶标板 5 次,用吸水纸彻底拍干。

7. 显色:各孔加入显色剂 A 液 50ul 后,再加入显色剂 B 液 50ul。

8. 终止:25-37℃下避光反应 10-15 分钟,加入 50ul 终止液。

9. 读板:在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。

纤维连接素相关抗原(FRA)试剂盒实验操作要点


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